Práctica 12.Pruebas bioquímicas bacilos gram negativos

Pruebas bioquímicas para bacilos gram negativos                                            10-1-2020

En esta práctica vamos a realizar las pruebas para la identificación de bacilos gram negativos

       

Materiales
-->Asas de siembra
--> Mechero
--> Gradilla
--> Tubos para pruebas bioquímicas

Procedimiento
1.Kligler
-Tomamos un colonia del microorganismo
-Se siembra en el tubo con hilo de platino en picadura en el fondo del tubo y despues se siembra en estría sobre la superficie del pico de flauta
-Se incuba a 37º durante 24h


2.INVIC
a)Producción de Indol
-En el caldo de peptona se inocula una colonia del microorganismo
-Se incuba a 37º durante 24h
-Tras ese tiempo se añaden 3 gotas de reactivo de Kovacs
-Observamos de que color se forma el anillo

b)Rojo de metilo
-Se inoculan colonias bacterianas en un tubo con medio de Clark-Lubs
-Se incuban a 37º durante 24h
-Tras ese tiempo añadimos varias gotas de solución alcohólica de rojo de metilo
-Observamos el tubo y si aparece un color rojo estable la prueba es positiva

c)Voges proskauer
-Se inoculan colonias bacterianas en un tubo con medio de Clark-Lubs
-Se incuban a 37º durante 24h
-Tras ese tiempo añadimos unas gotas de solución alfa-naftol, agitamos y añadimos KOH al 40%
-Observamos tras 15 min
-Si se vuelve de color rojo-fucsia la prueba es positiva

d)Citrato
-Cogemos un tubo con medio Simmons en pico de flauta
-Sembramos con el asa de siembra en la superficie inclinada una colonia
-Incubamos durante 24h a 37º
-Si se vuelve azul la prueba es positiva


3.Test de la urea
-Cogemos un tubo que contenga caldo urea indol
-Inoculamos una colonia bacteriana
-Incubamos durante 24h a 37º

4.APIS
-Preparamos un inoculo con el microorganismo
-Llenamos los pocillos del API según correspondiera
-Introdujimos la galería API en una cámara húmeda
-Observamos los resultados y revelamos las pruebas correspondientes con los reactivos adecuados