Práctica 9. Pruebas bioquímicas

12-11-19

-Objetivo
En esta práctica vamos a realizar una serie de pruebas bioquímicas para identificar el tipo de microorganismo

-Fundamento
Dependiendo del microorganismo nos dará positivo o negativo en ciertas pruebas y así poder ir descartando para averiguar el microorganismo

-Materiales

--> Placa con medio mannitol salado 

--> Placa con medio dnasa

-->Gradilla

-->Tubo se siembra en picadura
-->Parafina
-->Disco de novobiocina
-->Mechero bunsen
-->Asas de siembra
--> Microorganismos

-Procedimiento
a) Catalasa
1.Cogimos un porta y depositamos una colonia
2.Añadimos una gota de agua oxigenada
3.Observamos si hay burbujas, en ese caso seria positiva
4.En nuestro caso salieron burbujas por lo que el microorganismo es catalasa positivo y es un estafilococo


b)O/F
1.Sembramos la muestra en picadura en dos tubos con medio de Hugh Leifson
2.En uno de los tubos se añade parafina liquida estéril
3.Los incubamos durante 24-48 h
4.Observamos los tubos, ninguno de los dos cambió de color, pero se debió a que el medio de los tubos estaba en malas condiciones


c)Fermentación en manitol
1.Realizamos una siembra por agotamiento de estrias en una placa con medio manitol salado
2.Tras incubar las placas, las observamos pero no hubo cambio de color por lo que el microorganismo no fermenta el manitol


d)DNAsa
1.En una placa que contiene agar DNAsa, sembramos la muestra
2.Realizamos una estria de unos 2cm
3.Tras incubarlo, hacemos la lectura añdiendo HCl
4.No viro ninguno


e)Coagulasa
1.La realizamos en tubo
2.Emulsionamos bastantes colonias en un tubo de ensayo con 0,5ml de plasma citratado
3.Incubamos a 37º
4.Si se observa la formación de un coagulo a las 4h
5.En este caso si observamos un coagulo
f)Novobiocina
1.Realizamos una siembra en masa en una placa de petri
2.Con unas pinzas cogimos un disco de novobiocina
3.Depositamos el disco en el centro de la placa
4. Apareció un halo de inhibición alrededor del disco, por lo que el microorganismo era sensible a la novobiocina