Práctica 4. Frotis y tinciones simples
Frotis bacteriano y tinciones simples 12-10-19
-Objetivo
En esta práctica vamos a realizar extensiones bacterianas a partir de muestras sólidas y liquidas, ademas realizaremos tinciones simples con las extensiones y observar los resultados al microscopio
-Material
-->Asa de siembra
-->Mechero bunsen
-->Portaobjetos
-->Muestras (yogourt, levadura, sarro...)
-->Colorantes para tincion
-->Aceite de inmersión
-->Microscopio
-->Gradillas
-->Pinzas para portas
-->Cubetas y paralelas
-Procedimiento
a)Bacterias del yogourt
1.Flameamos el asa de siembra
2.Introducimos el asa en agua destilada para coger 1 gota
3.Depositamos la gota de agua sobre el porta
4.Flameamos el asa de nuevo y la enfriamos tocando el borde del recipiento del yogourt
5.Tomamos una minima porcion del yogourt
6.Depositamos la muestra sobre el porta y la extendemos realizando pequeños circulos
7.Dejamos secar el porta al aire
8.Lo fijamos con calor pasandolo 3 veces por la llama del mechero
9.Se deja enfriar antes de teñir
10.Colocamos el porta sobre las paralela de la cubeta
11.Cubrimos el porta con azul de metileno y esperamos durante 1-2 min
12.Lavamos con agua destilada y lo dejamos secar
13.Una vez seco observamos la preparación al microscopio con el objetivo de 100x poniendo previamente 1 gota de aceite de inmersión
b)Levaduras
1.Se realizan los mismos pasos anteriores
2.En la tinción utilizamos teñimos con un colorante rojo durante 1-2 min, lavamos y secamos
3.Observamos la preparación al microscopio con el objetivo de 100x añadiendo previamente 1 gota de aceite de inmersión
c)Bacterias del sarro dental
1.Depositamos 1 gota de agua destilada sobre un porta con el asa previamente flameada
2.Flameamos el asa de nuevo
3.Con un hisopo estéril tomamos una pequeña porción de sarro dental y lo suspendemos y homogeneizamos en la gota de agua
4.Realizamos el frotis
5.Lo dejamos secar al aire
6.Lo fijamos con calor como en las otras extensiones
7.Lo teñimos con colorante rojo durante 2 min
8.Lo lavamos y secamos
9.Observamos la preparación con el objetivo de 100x añadiendo previamente 1 gota de aceite de inmersión
-Objetivo
En esta práctica vamos a realizar extensiones bacterianas a partir de muestras sólidas y liquidas, ademas realizaremos tinciones simples con las extensiones y observar los resultados al microscopio
-Material
-->Asa de siembra
-->Mechero bunsen
-->Portaobjetos
-->Muestras (yogourt, levadura, sarro...)
-->Colorantes para tincion
-->Aceite de inmersión
-->Microscopio
-->Gradillas
-->Pinzas para portas
-->Cubetas y paralelas
-Procedimiento
a)Bacterias del yogourt
1.Flameamos el asa de siembra
2.Introducimos el asa en agua destilada para coger 1 gota
3.Depositamos la gota de agua sobre el porta
4.Flameamos el asa de nuevo y la enfriamos tocando el borde del recipiento del yogourt
5.Tomamos una minima porcion del yogourt
6.Depositamos la muestra sobre el porta y la extendemos realizando pequeños circulos
7.Dejamos secar el porta al aire
8.Lo fijamos con calor pasandolo 3 veces por la llama del mechero
9.Se deja enfriar antes de teñir
10.Colocamos el porta sobre las paralela de la cubeta
11.Cubrimos el porta con azul de metileno y esperamos durante 1-2 min
12.Lavamos con agua destilada y lo dejamos secar
13.Una vez seco observamos la preparación al microscopio con el objetivo de 100x poniendo previamente 1 gota de aceite de inmersión
b)Levaduras
1.Se realizan los mismos pasos anteriores
2.En la tinción utilizamos teñimos con un colorante rojo durante 1-2 min, lavamos y secamos
3.Observamos la preparación al microscopio con el objetivo de 100x añadiendo previamente 1 gota de aceite de inmersión
c)Bacterias del sarro dental
1.Depositamos 1 gota de agua destilada sobre un porta con el asa previamente flameada
2.Flameamos el asa de nuevo
3.Con un hisopo estéril tomamos una pequeña porción de sarro dental y lo suspendemos y homogeneizamos en la gota de agua
4.Realizamos el frotis
5.Lo dejamos secar al aire
6.Lo fijamos con calor como en las otras extensiones
7.Lo teñimos con colorante rojo durante 2 min
8.Lo lavamos y secamos
9.Observamos la preparación con el objetivo de 100x añadiendo previamente 1 gota de aceite de inmersión
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